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          助力抗疫|人源化ACE2小鼠模型

          2021-12-21 文章來源: 瀏覽量: 分享到:

          新冠爆發已兩年有余,截至2021年12月,全球疫情累計確診病例超過2.6億,累計死亡人數超過522萬。從疫苗的研發到近期國內首個”特效藥“的獲批上市,無數科研工作者都為戰勝新冠疫情做出了重要的貢獻。

          維通達研發平臺也在不斷開發從體內到體外檢測一系列針對新冠病毒的產品及服務,助力科研工作者和醫務工作者早日戰勝新冠疫情。


          hACE2人源化小鼠模型


          精準的動物模型是疫苗測試和新藥篩選的有力工具,能為控制新冠肺炎疫情提供堅實的科技支撐。血管緊張素轉化酶2 (ACE2,angiotensin converting enzyme2)是新冠病毒的主要受體。維通達構建了兩種hACE2敲入小鼠模型。


          ·hACE2隨機轉基因的條件性表達小鼠模型

          命名為Tg-lsl-hACE2/VST。把hACE2置于CAG啟動子的調控下,并在兩個序列間加上轉錄終止序列,該小鼠與Cre工具鼠合籠后,將在Cre特異表達的器官中刪除轉錄終止序列,hACE2在該器官高表達。我們將該小鼠與肺臟上皮細胞特異表達的Cre小鼠 (Sftpc CreERT2)合籠并誘導Cre表達后,利用hACE2特異性抗體檢測小鼠肺臟hACE2的表達情況,獲得一個肺臟高表達hACE2的line,推測該小鼠易于被新冠病毒或者SARS-CoV-1感染。

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          ·hACE2編碼序列原位敲入小鼠模型

          命名為B6-hACE2-KI/VST。利用CRISPR/Cas9技術把hACE2原位敲入到小鼠X染色體上的Ace2位點,使hACE2在小鼠Ace2基因的驅動下表達,陽性動物中hACE2具有與小鼠的Ace2相同的表達模式,而且所有小鼠的遺傳背景一致。原位敲入小鼠大部分都采用這種策略,如用于新冠疫苗測試的中檢院的hACE2-KI/NIFDC人源化小鼠模型。


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          新冠中和抗體的中和活性檢測



          中和抗體是當病原微生物侵入機體時會產生并能夠消除病原微生物感染能力的相應抗體。維通達使用新冠假病毒法進行中和抗體的中和活性檢測,詳述如下:SARS-CoV-2假病毒以HIV病毒為骨架,外面包被SARS-CoV-2的Spike蛋白 (包括原始毒株、lamda株和delta株),能夠感染過表達人ACE2的細胞。假病毒只能單次感染,不能復制,安全性高,可在P2級實驗室使用。



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          過表達hACE2的細胞系


          維通達目前有三種過表達hACE2的細胞系,分別是hACE2-HeLa、hACE2-COS7和hACE2-3T3細胞系。可用于抗SARS-CoV和SARS-CoV-2藥物的體外評估、中和抗體、疫苗與冠狀病毒發病機理及病毒檢測分析等實驗研究。





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