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        1. 服務熱線

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          SARS-CoV-2 假病毒

          SARS-CoV-2 假病


          假病毒描述:

          SARS-CoV-2假病毒以HIV病毒為骨架,外面包被SARS-Cov-2Spike 蛋白,能夠感染過表達人ACE2的細胞??捎糜跍y試研究阻斷病毒侵入的中和抗體或其它藥物。假病毒只能單次感染,不能復制,安全性高,可在P2級實驗室使用。

           

          假病毒參數:

          產品名稱

          SARS-CoV-2 假病毒

          貨號

          VS-SC-0001

          熒光基團

          eGFPLuciferase

          生物安全防護措施

          P2級實驗室

          包裝

          100~200ul

          感染滴度

          2×105 TU*(基于hACE2-COS7細胞)

          拷貝數

          108

          保存

          -80

          * TUtransfection unit),1TU=使1個細胞發出綠色熒光。

           

          假病毒制備:

          維通達將Spike蛋白表達質粒、包裝質粒、轉移質粒共轉染到293T細胞內,包裝出以SARS-CoV-2-Spike為表面衣殼蛋白的假病毒。假病毒同時帶有Firefly LuceGFP標記,可以通過有Firefly LuceGFP檢測感染。示意圖如下:

          d14abe195395274291be8f9ebc14c8e6-sz_278476.png

          注意事項:

          1) 病毒使用PEG8000濃縮,會有血清蛋白沉淀,外觀渾濁,但不影響使用。

          2) 病毒干冰運輸,-80℃保存,使用前室溫融化。

           

          使用方法:

          1. 第一天,96孔板每孔接種5×103hACE2-COS7細胞。

          2. 第二天,除去培養板里的培養基,新鮮培養基(100ul/孔)與假病毒2×103 TUPolybrene混合(5ug/ml終濃度),加入培養孔,培養板離心(1200g x 2 Hour,4℃)。

          2×103 TU時,luciferase的亮度約為1×106)。

          3. 離心感染的細胞,吸干凈培養基,再用PBS洗一次;每孔加入30ul 0.25%的胰酶,37℃孵育5min,加入100ul完全培養基,繼續培養。

          4. 感染后繼續培養3天(每天換液),進行luc檢測,也可以觀察eGFP熒光(根據情況更換培養基)。



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